Identificación de espermatozoides humanos en muestras contaminadas con levaduras
DOI:
https://doi.org/10.29059/cienciauat.v12i1.840Palabras clave:
espermatozoide, levaduras, semen, medicina legal, técnicas microscópicas.Resumen
La violencia sexual es un problema mundial, y representa un delito grave que frecuentemente es difícil imputar, ante la ausencia de testigos. La valoración de las muestras de semen enviadas al laboratorio, para la detección de espermatozoides, es de gran importancia para encontrar al agresor; sin embargo, la evidencia no es sencilla, por la presencia de otros organismos y la labilidad espermática. El objetivo del presente estudio fue identificar espermatozoides humanos en muestras contaminadas con levaduras. Se aplicaron diferentes técnicas y recursos microscópicos. Se seleccionaron 46 muestras de semen fresco. Se dividieron en dos grupos: G1 normo u oligozoospérmicas (n = 28) y G2 azoospérmicas (n = 18). Cada muestra se diluyó 1:1 con solución fisiológica y se agregaron 0.05 mL de suspensión de levaduras Candida albicans. Como control, se procesaron testigos puros de espermato-zoides (CE) y levaduras (CL). Las muestras se analizaron con microscopio óptico (MO), contraste de fase (CF), de luz polarizada (LP) y microscopio fluorescente (MF) con diferentes técnicas de tinción. El tinte Papanicolaou mostró mayor eficiencia que el tinte hematoxilina verde brillante (P < 0.05) para identificar espermatozoides con microscopio óptico. La detección de elementos refringentes mostró mayor correlación con la presencia de espermatozoides (CF: r = 0.966; P < 0.001), que la presencia de elementos birrefringentes (LP: r = 0.737; P < 0.001) y elementos fluorescentes (MF: r = 0.487; P < 0.05). La microscopía confocal con tinción de blanco de calcofluor-azul de Evans y naranja de acridina permitió la identificación de contaminación por levaduras. El empleo de técnicas microscópicas auxiliadas con técnicas de tinción permite confirmar la presencia de espermatozoides enteros o fragmentados en muestras de semen contaminadas con levaduras.
Citas
Afanador-Contreras, M. I. y Caballero-Badilla, M. C. (2012). La violencia sexual contra las mujeres. Un enfoque desde la criminología, la victimología y el derecho. Refexión Política. 14(27): 122-133.
Aguilar-Cabrera, D. A. (2013). Una realidad insostenible en el Perú, en Apuntes sobre la violación sexual contra menores de edad. [En línea]. Disponible en: http://larepublica.pe/05-10-2013/acusados-de-violacion-impunes-ante-la-ley. Fecha de consulta: 28 de noviembre de 2016.
Alberts, B., Bray, D., Hopkin, K., Johnson, A., Lewis, J., Raff, M., and Walter, P. (2006). Introducción a la Biología Celular. Buenos Aires: Panamericana. 10 Pp.
Andrade-Rubio, K. L. (2016). Víctimas de trata: mujeres migrantes, trabajo agrario y acoso sexual en Tamaulipas. CienciaUAT. 11(1): 28-36.
Arroyo-Sánchez, G. (2016). Valoración Médico Legal de la víctima de delito sexual. Medicina Legal de Costa Rica. 33(1): 126-132.
Brito, L. F., Greene, L. M., Kelleman, A., Knobbe, M., and Turner, R. (2011). Effect of method and clinician on stallion sperm morphology evaluation. Theriogenology. 76(4): 745-750.
Carma, I. (2010). Métodos de Reconocimiento, Identificación e Individualización de manchas de semen. [En línea]. Disponible en: http://www.criminalistica.net/.../index.php?...metodos-de-reconocimiento-identificacion-e-i. Fecha de consulta: 31 de marzo de 2017.
Ccaza-Zapana, J. E. (2013). La nueva criminalística, en Sociedad Mexicana de Criminología capítulo Nuevo León, A.C. [En línea]. Disponible en: http//:www.somecrimnl.es.tl. Fecha de consulta: 2 de julio de 2016.
Collodel, G., Iacoponi, F., Mazzi, L., Terzuoli, G., Pascarelli, N. A., and Moretti, E. (2013). Light, polarizing, and transmission electron microscopy: three methods for the evaluation of sperm quality. Systems biology in reproductive medicine. 59(1): 27-33.
Cortés-Arboleda, M. R., Cantón-Duarte, J. y Cantón-Cortés, D. (2011). Naturaleza de los abusos sexuales a menores y consecuencias en la salud mental de las víctimas. Gaeta Sanitaria. 25(2): 157–165.
Dickens, B. (2015). Ethical issues after sexual assault. B. International Journal of Gynecology and Obstetrics. 128: 187-188.
Espín-Falcón, J. C., Valladares-González, A. M., Abad-Araujo, J. C., Presno-Labrador, C. P. y Gener-Arencibia, N. (2008). La violencia un problema de salud. Revista Cubana de Medicina General Integral. 24(4): 1-6.
Fernández-Moreno, S. Y. (2015). Postura de la Red Latinoamericana de Género y Salud Colectiva de ALAMES frente a la cobertura universal de salud. Ciudad de La Habana. Revista Cubana Salud Pública. 41(2): 349-350.
Fleitas, D. M. (2014). Delito y violencia en América Latina y el Caribe: Perfil de los países de la región. Ciudad Autónoma de Buenos Aires: Edición de la Asociación para el Análisis de Políticas Públicas. 25 Pp.
Forbes, B. A., Scottn, E. G., and Weissfeld, A. S. (2009). Bailey y Scott Diagnóstico Microbiológico. Buenos Aires: Panamericana. 705 Pp.
Gianaroli, L., Magli, M. C., Ferraretti, A. P., Crippa, A., Lappi, M., Capitani, S., and Baccetti, B. (2010). Birrefringence characteristics in sperm head sallow for the selection of reacted spermatozoa for intracytoplasmic sperm injection. Fertility and Sterility. 93(3): 807-813.
Guarner, J. and Brandt, M. E. (2011). Histopathologic diagnosis of fungal infections in the 21st century. Clinical microbiology reviews. 24(2): 247-280.
Khaldi, N., Miras, A., Botti, K., Benali, L., and Gromb, S. (2004). Evaluation of three rapid detection methods for the forensic identification of seminal fluid in rape cases. Journal of Forensic Science. 49(4): 1-5.
López-García, M. J., Urbano-Felice, A. y Cárdenas-Povedano, M. (2012). Manual de laboratorio para análisis del semen, en Omnia Science. [En línea]. Disponible en: http://www. omniascience.com/scholar/index.php/scholar/article/download/4/6. Fecha de consulta: 17 de octubre de 2013.
Ministerio Público Fiscalía de la Nación – Lima, Perú (2014). Víctimas de feminicidios registrados en Perú-julio 2014. Estadísticas sobre Feminicidio según las características de las víctimas y el presunto victimario-julio 2014. [En línea]. Disponible en: http://www.portal.mpfn.gob.pe/boletin_informativo/infoestadfeminicidio. Fecha de consulta: 30 de marzo de 2017.
OMS, Organización Mundial de la Salud (2013). Informe de la OMS destaca que la violencia contra la mujer es “un problema de salud global de proporciones epidémicas. Nuevas guías de práctica clínica y de políticas lanzadas para orientar la respuesta del sector salud, en Comunicado de prensa 20 de junio de 2013 Ginebra. [En línea]. Disponible en: http://www.who.int/mediacentre/news/releases/2013/violence_against_women_20130620/en/. Fecha de consulta: 30 de marzo de 2017.
Pavesi, A., Ombrella, A., Cadierno, A., Kuverling, L., Mansilla, R., Paparella, C. y Bouvet, B. (2015). Aplicación del microscopio confocal para la identificación de espermatozoides o cabezas espermáticas en presencia de levaduras con fines forenses. Revista de la Asociación Bioquímica Argentina. 71(1): 80.
Pavesi, A., Paparella, C., Bouvet, B., and Pituelli, N. (2008). Prostatic acid phosfatase activity in basal seminal plasma and post exposition to hight temperature. Biocell. 32(3): 29.
Pavesi, A., Paparella, C., and Bouvet, B. (2011). Lactate deshidrogenase: activity in human seminal plasma. Biocell. 35(2): 179.
Pavesi, A, Servidio, A., Paparella, C., Girolami, H. y Bouvet, B. (2010). Valoración de cinc en manchas seminales y su aplicación en la práctica forense. CienciaUAT. 4(3): 69-73.
Quispe-Mayta, S., Tarifa-Espinoza, S., Solíz-Pacheco, R., and Sierra-Gareca, A. (2010). Investigación forense del fluido seminal en víctimas de violencia sexual, por el Laboratorio de Biología Forense. BIOFARBO. 18(2): 91-99.
Saldaña, C., Morales-Tlalpan, V., and Castaño, V. N. (2010). Confocal microscopy: from fundamental optics to innovative applications. In A. Méndez-Vilas and J. Díaz (Eds.), Microscopy: science, technology, applications and education. [En línea]. Disponible en: http://www.formatex.info/microscopy4/1350-1355.pdf. Fecha de consulta: 3 de noviembre de 2016.
Sánchez, R. (2015). Abuso sexual en menores de edad, problema de salud pública. Unifé. Av. Psicol. 23(1): 62.
Sánchez-Armendáriz, K., Fernández–Martínez, R. F., Moreno-Morales, M. E., Villegas-Acosta, L., Meneses-González, F. y Arenas–Guzmán, R. (2013). Sensibilidad y especificidad del examen directo micológico con blanco de calcofluor para el diagnóstico de onicomicosis. Medicina Cutánea Ibero-Latino-Americana. 41(6): 261-266.
Stander, V. A. y Thomsen, C. J. (2016). El acoso sexual y asalto en el ejército de Estados Unidos: Un examen de las tendencias de política y de investigación. Medicina Militar. 181: 20-27.
Támara, K. L. (2013). Reconocimiento e identificación de manchas de semen en diferentes soportes de interés forense. [En línea]. Disponible en: http://guzlop-editoras.com/web_des /bio01/bioforense/pld0638.pdf. Fecha de consulta: 12 de agosto de 2013.
Tratado de Criminalística de la Policía Federal Argentina (2007). La química Analítica en la Investigación del Delito. [En línea]. Disponible en: http://doggy.blogcindario.com/2007/09/00008investigacion-de-espermios.html. Fecha de consulta: 2 de abril de 2017.
Turvey, B. F. (2014). Forensic victimilogy examining violent crime. Victims in investigative and Legal Context. Reino Unido: Elseiver. 546 Pp.
Vázquez, M. B., Amodeo, M. R. y Bianchinotti, M. V. (2016). Estimación de la biomasa fúngica en un suelo del sudoeste de la provincia de Buenos Aires (Argentina) con una tinción directa con Blanco de Calcofluor. Revista Argentina de Microbiología. 48(3): 252-258.
Vega-Vega, C., Navarro-Escayola, E. y Edo-Gil, J. C. (2014). Protocolo de actuación médico forense en los delitos contra la libertad sexual. Revista Española de Medicina Legal. 40(3): 120-128.
Villarroel-Rodríguez, P. y Santa Cruz-Rodríguez, A. (2011). Identificación de especies de levaduras del género Candida aislados de exudados vaginales de pacientes en el Hospital Materno Germán Urquídi. Gaceta Médica Boliviana. 34(2): 84-86.
WHO, World Health Organization (2010). WHO laboratory manual for the examination of human semen and sperm servical-mucus interaction. [En línea]. Disponible en: www.cnrha.msssi.gob.es/bioetica/pdf/semen_humano.pdf. Fecha de consulta: 30 de marzo de 2017.
